QCKX®-DM是一款适用于难转细胞的DNA专用转染试剂,可用于质粒DNA的高效传送。它具有极强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有转染效率高、不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围: QCKX®-DM转染试剂可适用于众多难转染细胞株的DNA转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种难转细胞如BMDC、4T1、CT26、DC2.4等难转染细胞,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
质粒DNA的转染:
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24 小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度
2 DNA稀释: 将质粒DNA稀释于Opti-MEM培养基中,终浓 度0.1mg / mL
3 复合物制备: 取2µL的QCKX®-DM试剂原液加入到 8µL Opti-MEM培养基中,取4 µL浓度为0.1mg / mL的质 粒DNA加入6µL Opti-MEM培养基中,两者等体积混合
4 室温静置10分钟
5 每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养 18~48小时后检测基因表达,无需更换培养基
质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、 DNA浓度以及GoldenTran®-DM浓度对 转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,GoldenTran®-DM (µL):DNA (µg)可以在2:1和5:1之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量

QCK®X-DM-0.1ml